Lymphotherapy induce an increase of blocking factors and correct infertility problems / La Linfoterapia induce aumento de factores bloqueadores y corrige problemas de infertilidad

This study aimed to confirm the presence of Blocking Factors (BFs) in Mixed Lymphocyte Culture (MLC) from female normal reproducer and sub-fertile rabbit inoculated with two injection of the allogenic lymphotherapy (LIT) to analyze its effect on rate fertility and pregnancy success. The BFs measuring was done intervening MLC with MTT-Formazan non-radioactive technique. It was demonstrated BFs presence in MLC in female rabbit groups. In sub-fertile female reproducers treated with allogenic lymphotherapy a significant increase in the level of FBs after every LIT was observed, as well as a rate fertility increase. Furthermore, it was established that BFs act on cell proliferation inhibiting the MLC of other species, clearly indicating that the inhibit effect of the BFs is inter-specific and no intraspecific as had sustain until now.

Esta investigación se basó en un modelo experimental de origen animal, dirigido a comprobar la existencia de factores bloqueadores (FBs) del cultivo mixto de linfocitos (CML) en grupos de conejas reproductoras normales y subfértiles. A los animales de experimentación se les aplicó dos dosis de Linfoterapia (LIT) alogénica, con el fin de analizar sus efectos en el aumento de la tasa de fertilidad y del éxito gestacional. La medición de los FBs se realizó mediante CML con la técnica no radioactiva MTT-Formazan. Se comprobó la existencia de FBs del CML en todos los grupos de conejas estudiados. En conejas reproductoras subfértiles tratadas con LIT alogénica se observó un incremento significativo de los niveles de los FBs después de cada LIT, así como el aumento en la tasa de fertilidad de las mismas. Además, se estableció que los FBs de proliferación celular actúan inhibiendo el CML de otras especies, lo que indica claramente que el efecto inhibitorio de FBs es interespecífico y no intraespecífico como se ha sostenido hasta ahora.

Establecimiento y caracterización de una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme / Initiation and characterization of a glioblastoma multiforme derived cell line

Introducción: Las líneas celulares y los cultivos primarios son una excelente herramienta para el estudio de la biología, desarrollo y respuesta a la terapia en tumores cerebrales. Objetivo: Establecer y caracterizar una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme como un modelo de estudio in vitro para la extrapolación y aplicación futura en terapia génica. Material y métodos: Se obtuvo una muestra de un paciente con diagnóstico clínico e histopatológico de glioblastoma multiforme, se caracterizó mediante inmunohistoquímica en cortes de tejido y por inmunocitoquímica sobre células cultivadas a partir del tumor desde el inicio del cultivo y durante los seis primeros pases, con dos tipos de marcadores específicos para glía: GFAP (glial fibrillary acidic protein) y S-100 (proteína de unión a calcio). Además, se evaluó la expresión de p53 y Bcl-2, como moduladores de apoptosis. Por último se hizo la caracterización citogenética. Resultados: Histopatológicamente, se confirmó el diagnóstico de glioblastoma multiforme. En los cultivos primarios se encontraron características citomorfológicas propias de un glioblastoma: células fibroblastoides planas, células con escaso citoplasma con 3 ó más procesos y por último bipolares o unipolares. Se encontró una expresión diferencial con los cuatro marcadores, con un patrón de marcaciones a nivel citoplasmático y nuclear a través de los pases estudiados. La línea celular se caracterizó por ser en su mayoría aneuploide con un número modal cromosómico entre 43 y 45, con un gran número de poliploidías (55-102 <4n>, XXYY) y endo-reduplicaciones (end 45, X, -Y). Conclusión: Se estableció una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme con un fenotipo estable, con un notable mantenimiento del perfil glial y citogenético.

Introduction: Cell lines and primary cultures are a useful tool for studying basic biology, development and therapy responses in cancer and nervous system tumors. Aim: To establish and characterize a human glioblastoma multiforme (GBM) derived cell line as an in vitro biological model to study nervous system cancer chemotherapy and gene therapy. Materials and methods: A resected tumor piece was obtained from a patient with clinical and histopathological diagnosis of GBM. It was processed to obtain viable cells to culture and histological sections, which were immunostained to glial fibrillary acid protein (GFAP) and S-100 protein (calcium binding protein) and to evaluate expression of apoptosis related proteins p53 and Bcl-2. Finally a cytogenetic evaluation was carried out. Results: Histopathological examination confirmed classic findings of GBM. Typical cytomorphological features of GBM were found in cells of the primary cultures: bipolar or unipolar cells, flat fibroblastoid cells, process-bearing cells with scant cytoplasm and 3 or more processes. It was found a differential expression of the four markers, which had a nuclear and cytoplasmatic staining pattern throughout studied subcultures. Cell line exhibited a high level of aneuploidy with modal chromosomal number between 43-45, with presence of poliploidy (55-102 <4n>, XXYY) and endoreduplication (end 45, X, -Y). Conclusion: It was established a GBM derived cell line with a stable phenotype, maintaining morphological cell and cytogenetic characteristics.

HLA-G: su importancia inmunológica / HLA-G: It´s immunological importance

HLA-G es una molécula clase I no clásica (Ib) del Complejo Mayor de Histocompatibilidad Humano(CMH), adopta siete isoformas, resultado del empalme alternativo de un mismo RNA inmaduro, cuatro seencuentran ligadas a la membrana (HLA-G1,-G2, -G3, -G4) y las otras tres formas son solubles (HLA-G5, -G6, -G7), teniendo en común el dominio extracelular a1. Se expresa de forma selectiva en la interfase maternofetal desempeñando un papel crucial en la inducción de un estado de tolerancia del feto semialogénico por el sistema inmune materno. Está molécula inhibe la citólisis de las NK mediante la interacción con uno o varios receptores inhibidores presentes en las NK (KIR), presenta un limitado polimorfismo, se han descrito15 alelos, 14 de los cuales asignados por la nomenclatura del HLA. El HLA-G está asociado con algunas patologías en la gestación, tales como las infecciones intrauterinas; pre-eclampsia y en aborto recurrente espontáneo. Los estudios van dirigidos a controlar mejor las interacciones HLA-G/células NK en la inducción de un estado de tolerancia inmunitaria en el campo del transplante y la inmunología de los tumores.

El papel de la linfoterapia en la corrección de problemas de infertilidad de causa inmunológica / Lymphotherapy and fertility

Esta investigación se basa en un modelo experimental de origen animal dirigido a comprobar la existencia de Factores Bloqueadores (FBs) del Cultivo Mixto de Linfocitos (CML) en grupos de conejas reproductoras norma les, y subfértiles a quienes se les aplicó dos dosis de Linfoterapia (LIT) alogénica con el fin de analizar sus efectos en el aumento de la tasa de fertilidad y del éxito gestacional. La medición de los FBs se realizó mediante CML con la técnica no radioactiva MTT-Formazan. Se comprobó la existencia de FBs del CML en todos los grupos de conejas estudiados. En conejas reproductoras subfértiles tratadas con LIT alogénica se observó un incremento significativo de los niveles de los FBs después de cada LIT, así como el aumento en la tasa de fertilidad de las mismas. Además, se estableció que los FBs de proliferación celular actúan inhibiendo el CML de otras especies, lo que indica claramente que el efecto inhibitorio de FBs es interespecífico y no intraespecífico como se ha sostenido hasta ahora